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  • 酶底物檢測方法
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酶底物法MUG試劑-總大腸專(zhuān)用


介紹

      酶底物法檢測試劑可以同時(shí)檢測水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌或者耐熱()大腸菌群,GB/5750.122006標準檢驗方法,如果水樣中存在總大腸或者耐熱()大腸菌群,則它的特異性代謝產(chǎn)物與試劑( MMO-MUG培養基)的主要成分0NPG反應,使溶液顯黃色;如水樣中有大腸埃希氏菌,則它的特異性代謝產(chǎn)物與MM0MUG培養基中的MUG反應使溶液顯熒光。并且可以在24小時(shí)內同時(shí)檢測出總大腸菌群和大腸埃希氏菌或者耐熱()大腸菌群,并可以抑制100m水樣中的2百萬(wàn)個(gè)雜菌干擾,最低檢出限為1ctu(總大腸菌群和大腸埃希氏菌或者耐熱()大腸菌群)/100m水樣。

包裝

每包裝100個(gè)檢測試劑,用于檢測100mL水樣。

儲存條件

2-30°0避光儲存。

定性檢測

1.將一個(gè)包裝試劑倒入裝有100m水樣的無(wú)菌取樣瓶中。

2.蓋上蓋子,搖勻。

3.放在36±1℃培養24小時(shí);或者放在44.5±0.2,培養24小時(shí)。

4.根據下表的說(shuō)明判斷定性檢測結果。

定量檢測(用于檢測100m水樣)

1.將一個(gè)試劑倒入裝有100m水樣的無(wú)菌取樣瓶中。

2.蓋上蓋子,搖勻。

3.將水樣全部倒入51孔或97孔定量盤(pán)中,使用專(zhuān)用的程控定量封口機封口。

4.放在36±1℃培養24小時(shí);或者放在44.5±0.2,培養24小時(shí)。

5.根據下表的說(shuō)明讀取定量檢測結果,數出陽(yáng)性格子數后對照MPN表得到定量檢測結果

檢測結果說(shuō)明

現象

結果

36±144.5±0.2溫度下培養24小時(shí),顏色比陽(yáng)性對照物的黃色淺

總大腸菌群,大腸埃希氏菌陰性耐熱()大腸菌群陰性

36±1培養24小時(shí),顏色與陽(yáng)性對照物的黃色相同或者顏色更深

總大腸菌群為陽(yáng)性

44.5±0.2℃培養24小時(shí),顏色與陽(yáng)性對照物的黃色相同或者顏色更深

耐熱()大腸菌群陽(yáng)性

36±1℃培養24小時(shí),顏色與陽(yáng)性對照物的黃色相同或者顏色更深,且在紫外燈下顯熒光

大腸埃希氏菌為陽(yáng)性

 

在暗室中,使用6,366nm的紫外燈在距樣品1厘米左右的位置觀(guān)測是否顯熒光。

結果應在24-28小時(shí)內讀取。此外,總大腸菌群和大腸埃希氏菌或耐熱()大腸菌群培養時(shí)間小于2小時(shí)已經(jīng)為陽(yáng)性;或總大腸菌群和大腸埃希氏菌或耐熱()大腸菌群大于28小時(shí)依然為陰性,則結果也有效。

實(shí)驗注意點(diǎn)

 檢測試劑可以使用多管法進(jìn)行檢測。檢測結果可參閱《水與廢水檢驗標準測試方法》中的MPN

 如果水樣品有背景顏色,請做一個(gè)空白試驗,與檢測結果相比較

 如果水樣品被稀釋,則在讀取MPN表時(shí)乘以相應的稀釋倍數

 只可使用滅菌水,不含緩沖液的水,不含氧化劑的水進(jìn)行樣品稀釋。

 試劑用于常規水樣檢測,不可以用于濃縮水樣。

 ⑥如果樣品中含有過(guò)多的氯,則加入科立得可能顯藍光,則該水樣不可用。

 無(wú)需在無(wú)菌室中進(jìn)行但操作過(guò)程應避免微生物污染



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