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一、概述

海研智能程控定量封口機是由智能電路電驅動(dòng)，內部專(zhuān)用加熱輥，專(zhuān)門(mén)用于51孔定量盤(pán)和 97 孔定量盤(pán)封膜作用，配合微生物檢測試劑使用，提供簡(jiǎn)單、快速、定量檢測總大腸菌群、大腸埃希氏菌、糞（耐熱）大腸菌群、腸球菌和綠膿假單胞菌的實(shí)驗方案；51 孔定量盤(pán)和 97 孔定量盤(pán)是基于傳統方法可能數 (MPN) 統計模型而設計的半自動(dòng)定量方法，可定量檢測出水樣結果，這種方法可以替代并優(yōu)于傳統（濾膜、及多管發(fā)酵）方法檢測水中微生物。

二、適用范圍:

用于水樣中的綠膿假單胞菌群、腸球菌、總大腸菌群和糞大腸桿菌、大腸埃希菌、菌落總數的快速檢測、可野外攜帶、應急、定量檢測。

三、產(chǎn)品描述：

酶底物法檢測裝置由程控定量封口機、51 或 97 孔定量檢測盤(pán)、100mL定量瓶、酶底物法檢測試劑四部分組成，檢測水樣范圍:飲用水、源水、瓶裝水、中水、二次供水、管網(wǎng)水、廢水、食品水、畜牧用水、醫療用水等。

優(yōu)勢特點(diǎn)：

酶底物法為 GB5750-2006 及HJ1001-2018收錄的用于大腸桿菌檢測標準方法，酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的不錯方法，目前以其方便快捷，假陽(yáng)性低，適用大量樣品快速檢測等優(yōu)點(diǎn)正逐步被國內檢測部門(mén)所認可。

相對于多管發(fā)酵和濾膜法，酶底物法檢測步驟大大減少，而且對實(shí)驗環(huán)境要求不高，檢測時(shí)間可減少到 24 小時(shí)，在日常水樣監測及應急監測中具有很好的應用前景，可及時(shí)檢測，預防，一定限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。 以GB5750-2006 中總大腸菌群測定為例，比較三種方法，如表所示。

方法優(yōu)勢：

1.無(wú)需在無(wú)菌室內操作。

2.手工操作時(shí)間小于 1 分鐘。

3.無(wú)需培養基制備和大量玻璃器皿滅菌。

4.24小時(shí)即可完成定性定量分析，無(wú)需驗證試驗。

技術(shù)參數

四、51孔和97定量盤(pán)操作說(shuō)明

51孔和97孔定量盤(pán)滅菌消毒

定量盤(pán)與酶底物法配合使用，定量檢測100ml水中微生物，將酶底物法試劑與檢測水樣混合后加入到51孔或者97孔定量盤(pán)中，使用程控定量封口機封膜，根據檢測不同項目的培養溫度和時(shí)間進(jìn)行培養（24H），數出顯陽(yáng)性的孔格，對照MPN表讀結果。

【工作原理】

加入含有總大腸菌群細菌的水樣，目標細菌在Minimal Medium ONPG-MUG培養基中36℃±1℃培養，總大腸菌群細菌產(chǎn)生的特異性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Minimal Medium ONPG-MUG培養基中的色源底物ONPG,使培養呈現黃色；同時(shí)水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培養基中的熒光底物MUG，產(chǎn)生特征性熒光。同樣原理，耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5℃培養時(shí)會(huì )分解Minimal Medium ONPG-MUG培養基中的色源底物ONPG，使培養基呈現黃色。

【使用方法】

①定性測試：

第一步、在100ml水樣中加入試劑，溶解，36℃±1℃培養24h；

第二步、結果判讀

無(wú)色=陰性

黃色=總大腸菌群陽(yáng)性

黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養24h后，觀(guān)察黃色為陽(yáng)性

②定量檢測

第一步、在100ml水樣中加入試劑，溶解；

第二步、倒入51孔定量檢測盤(pán)（定量孔板）或97孔定量檢測盤(pán)（定量孔板）中；

第三步、用程控定量封口機對定量檢測盤(pán)（定量孔板）進(jìn)行封膜，36 ℃±1℃培養24h；

第四步、定量檢測盤(pán)（定量孔板）結果判讀：

無(wú)色=陰性

黃色格子=總大腸菌群陽(yáng)性

黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性

查對照MPN表計數

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養24h后，觀(guān)察黃色格子為陽(yáng)性結果，查對照MPN表計數。